糖水偏好測試(Sucrose Preference Test, SPT)是一種基于動物對甜味天然偏好的行為學范式,通過量化嚙齒類動物對含糖溶液與純水的選擇差異,評估其獎賞系統(tǒng)功能及快感缺失(Anhedonia)狀態(tài)。該實驗廣泛應用于抑郁樣行為、成癮戒斷反應及抗抑郁Yao物療效的研究中,其原理在于健康動物對糖水的攝取顯著高于純水,而抑郁或壓力模型動物因多巴胺能通路抑制(如伏隔核功能受損)會表現(xiàn)出糖水偏好降低,這一現(xiàn)象與人類抑郁癥患者的快感缺失具有同源性。
實驗材料與準備
1.動物適應:實驗前需將小鼠單籠飼養(yǎng)3-7天,消除社會交互干擾,并在恒溫(22±1℃)、恒濕(50±5%)、低噪音(<55dB)環(huán)境中適應。
2.糖水配置:使用1%-2%蔗糖溶液(W/V),避免濃度過高引發(fā)代謝干擾。蔗糖需新鮮配制,室溫放置不超過3天以防微生物污染
3.飲水裝置:采用雙瓶(糖水與純水)設計,水瓶容量為小鼠50mL、大鼠100mL。需使用防漏專用水壺,避免墊料吸水和稱重誤差。水瓶位置每6-12小時交替,消除位置偏好。
實驗流程
--糖水暴露:前48小時提供雙瓶1%蔗糖溶液,建立甜味認知。
--偏好訓練:替換其中一瓶為純水,持續(xù)24小時,期間每12小時交換瓶位
2.正式測試
--禁水14-23小時(大鼠)或9-16小時(小鼠)以增強飲水動機。
--同時提供糖水瓶與純水瓶,記錄1-24小時內(nèi)的攝取行為。部分方案在30分鐘后交換瓶位,進一步控制位置偏差。
--使用自動化系統(tǒng)(如光電/重量雙傳感器)實時監(jiān)測舔舐次數(shù)與時長,重量精度需≤0.01g,避免傳統(tǒng)稱重法8-15%的誤差。
糖水偏好實驗系統(tǒng),XR-XT212,上海欣軟
數(shù)據(jù)分析
1.核心指標為糖水偏好指數(shù)(SPI):
SPI=糖水消耗量/(糖水消耗量+純水消耗量)*100%
2.健康小鼠SPI通常>65%,抑郁模型(如慢性應激)可降至35-50%,而SPI<40%或較基線下降>20%被視為顯著快感缺失。
3.抗抑郁Yao物(如氟西?。└深A后SPI回升至正常水平,氯An酮等速效Yao物可在24小時內(nèi)逆轉低偏好狀態(tài)。
關鍵注意事項
1.品系與性別差異:C57BL/6小鼠對1%蔗糖敏感,而Wistar大鼠需2%濃度;雄性Wistar大鼠應激后SPI下降更顯著,實驗需統(tǒng)一品系、年齡與性別。
2.干擾控制:
--避免禁食過度導致饑餓動物因熱量需求過量飲用糖水。
--水瓶每日更換,清潔時徹底去除殘留液,防止掛壁誤差。
--行為學整合:SPT需結合強迫游泳、尾懸掛等測試,區(qū)分快感缺失與運動能力下降。
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